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PCR产物纯化回收试剂盒图片
产品货号:
LA10997
中文名称:
PCR产物纯化回收试剂盒
英文名称:
Quick Midi Purification Kit
产品规格:
50T|200T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等,得到高质量的DNA纯化产物。本试剂盒使用范围广,回收效率高,对于100bp~10kb DNA片段,回收率可达80%以上。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。




  • 快速:整个操作过程只需十几分钟,节省时间。
  • 多样:可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。
  • 高效:独特的离心柱和精心配制的缓冲液保证每次最大量回收到高纯度目的DNA。



组分50T200T
Buffer PR30mL120mL
Buffer PW15mL50mL
Buffer EB5mL15mL
纯化套件(吸附柱+收集管)50套200套
说明书1份1份

保存:室温,有效期一年。


  • 温度较低时,本试剂盒有的溶液可能产生沉淀,使用前在37℃水浴中加热,直至沉淀消失。
  • 本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有DNA片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。
  • 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
  • 所有离心步骤均为使用常规台式离心机在室温下进行离心,速度为12000rpm(~13400×g)。
  • 对于<100bp和>10kb的DNA片段可以适当的增加吸附和洗脱的时间。



使用前请先在缓冲液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
  • 将PCR反应液或酶切反应液移至一干净的离心管中,向其中加入5倍体积的Buffer PR,充分混匀。
    注意:若反应液体积过小,可用TE或水补足至100μL,然后再加入500μL Buffer PR。
  • 将混合液全部加入到吸附柱中(吸附柱放入收集管中),室温静置2min。12000rpm离心30sec,倒掉收集管中的液体,将吸附柱放入收集管中。
    注意:如果体系总体积大于750μL,则每次使用750μL,多次上柱。将滤出液再次加入吸附柱中过柱,可进一步提高DNA回收率。
  • 向吸附柱中加入600μL Buffer PW(使用前请先检査是否已加入无水乙醇),12000rpm离心30sec,倒掉收集管中废液,将吸附柱放入收集管中。
    注意:如果纯化的DNA是用于盐敏感的实验,例如平末端连接实验或直接测序,建议PW加入后静置2~5min再离心。
  • 重复操作步骤3。
  • 将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心2min,倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
    注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
  • 将吸附柱转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加30~50μL洗脱缓冲液EB,室温放置2~5min,12000rpm离心1min,将溶液收集到离心管中。
    注意:洗脱缓冲液体积不应少于30μL,体积过少影响回收效率。为提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液再加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心1min,将DNA溶液收集到离心管中。
    洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液,应保证其pH值在7.0~8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。



DNA浓度及纯度检测
  • 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
  • DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。
  • OD260/OD280比值应为1.7~1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。

相关搜索:PCR产物纯化回收试剂盒PCR产物DNA纯化试剂盒Quick Midi Purification Kit
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